类芽孢杆菌P-4-2st Strand cDNA Synthesis Kit-组织固定液(10%FA)
二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确的荧光信号检测是实验成功的关键。50× ROX Reference Dye作为一种常用的被动参考染料,为qPCR实验提供了重要的校准功能,确保了荧光信号的准确性和稳定性。 ROX Reference Dye的作用机制 ROX染料是一种被动参考荧光染料,其主要作用是校正qPCR反应中的非特异性荧光背景和孔间荧光信号的差异。在qPCR实验中,荧光信号的强度可能会受到多种因素的影响,如仪器的荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异等。ROX染料通过提供一个稳定的荧光背景,帮助校正这些非特异性信号,从而提高定量结果的准确性和重复性。 50× ROX Reference Dye的应用 荧光定量PCR(qPCR):在qPCR实验中,ROX染料通常以一定比例添加到反应体系中。它不会参与PCR反应,但会提供一个稳定的荧光背景,用于校正仪器检测到的荧光信号。通过校正,可以更准确地反映目标基因的扩增情况,从而提高定量结果的可靠性。 多重qPCR:在多重qPCR实验中,ROX染料的作用尤为重要。
在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。 使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。
Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。
DL2000 DNA Marker是一种广泛应用于琼脂糖凝胶电泳的DNA分子量标准,由特定长度的双链DNA片段组成,可用于估算DNA片段的大小。产品特性DL2000 DNA Marker通常包含6条双链线状DNA条带,分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。该Marker已预混有1×Loading Buffer,可直接用于电泳,使用方便。使用方法 电泳条件:建议在1.0% - 2.0%的琼脂糖凝胶中使用,电泳缓冲液可选用1×TAE或0.5 - 1×TBE。电压一般控制在5 - 10 V/cm,电泳时间根据凝胶浓度和电压调整。 上样量:通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。 染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存1 - 2年。避免反复冻融:反复冻融可能导致条带降解,影响电泳效果。
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液作为一种高效的辅助试剂,为核酸电泳提供了重要的支持。
50×TAE液体是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别是在琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中。TAE是Tris-Acetate-EDTA缓冲液的缩写,其主要成分包括三羟甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)。产品特性高效分离:TAE缓冲液在电泳大于13 kb的DNA片段时,能够取得更好的分离效果。迁移率快:双链线状DNA在TAE缓冲液中的迁移率较其他缓冲液快约10%。适用范围广:适用于基因组DNA、大分子超螺旋DNA、大于1500 bp的RNA和DNA的电泳分离。即用型设计:50×TAE液体为浓缩液,使用时只需用去离子水稀释50倍即可。使用方法配制1×TAE工作液:取20 mL的50×TAE液体,加入980 mL去离子水,充分混匀。电泳条件:凝胶浓度:通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。 电泳电压:建议4-10 V/cm,电泳时间根据片段大小调整。保存条件:室温保存,有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
适用性强:既可用于预制凝胶染色(胶染法),也可用于电泳后染色(泡染法),兼容多种核酸类型。
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的分析技术,用于分离和检测DNA片段。而10×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。它是一种10倍浓缩的上样缓冲液,专门用于DNA凝胶电泳,能够帮助DNA样品顺利沉入凝胶加样孔中,并在电泳过程中提供清晰的指示。 10×DNA Loading Buffer的主要成分包括甘油、溴酚蓝、二甲苯青FF和SDS。甘油的作用是增加样品的密度,确保DNA样品能够沉入凝胶孔中,防止样品漂浮。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青FF的迁移速率与4000个碱基对的DNA片段大致相同,而溴酚蓝的迁移速率则与约500个碱基对的DNA片段相同。 使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合。例如,对于9μL的DNA样品,加入1μL的10×DNA Loading Buffer,混匀后即可上样。这种缓冲液适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DNA和基因组DNA等。
其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL
溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)是一种专为核酸电泳设计的上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由溴酚蓝、二甲苯青FF和蔗糖组成,能够为核酸电泳提供清晰的指示和稳定的环境。产品特性成分:主要由0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF和15%蔗糖组成。指示剂:溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,稀释后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于观察电泳进程。保存条件:室温避光保存,有效期为3个月。 使用方法稀释:通常按1:5的比例将2×溴酚蓝蔗糖溶液稀释至1×使用。电泳操作:将稀释后的缓冲液与核酸样品混合后直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为核酸电泳实验中的理想选择。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!
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