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粗糙脉孢菌-NMY51酿酒酵母SaccharomycescerevisiaeNMY51NMY51-肉座菌属

2025-05-04 07:20分类: 质粒特点 阅读:

 

Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。

SYBR Green qPCR Mix通过比较目标基因与参考基因的Ct值,实现基因表达水平的定量分析

DNA Marker V是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为200 bp、400 bp、700 bp、1000 bp、1500 bp和2000 bp。其中,1000 bp条带的浓度较高(100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。

电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

λ DNA HindIII是一种经典的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII Marker由8条双链DNA条带组成,片段大小分别为125 bp、231 bp、564 bp、6557 bp、9416 bp13589 bp、20270 bp和23130 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL

在分子生物学研究中,长片段DNA扩增是许多实验的关键步骤,但传统PCR方法在扩增较长片段时常常面临效率低、特异性差等问题。Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye)的出现,为这一难题提供了高效的解决方案。 Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系。它以Ultra-Long DNA Polymerase为核心,这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据需要选择是否添加染料,或者直接用于下游应用,如克隆、测序或无染料的凝胶电泳分析。

Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 高保真性,快速扩展

T4 Gene 32 Protein(T4 gp32)是一种由T4噬菌体基因32编码的单链DNA(ssDNA)结合蛋白,广泛应用于分子生物学实验中。该蛋白在T4噬菌体的DNA复制和修复过程中起关键作用,能够协调性地结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域。 功能与特性稳定ssDNA:T4 gp32能够高效结合ssDNA,防止其降解或重新退火,尤其在DNA复制和修复过程中发挥重要作用。促进酶活性:该蛋白可显著提高限制性内切酶的消化效率、RT-PCR中反转录的效率,以及T4 DNA聚合酶的活性。增强PCR效率:在PCR反应中,T4 gp32能够提高产物的产量和特异性,特别是在处理复杂样本(如土壤样本)时,可有效降低抑制物的影响。应用场景电子显微镜观察:用于稳定和标记ssDNA区域,便于通过电子显微镜观察细胞内DNA的结构。重组酶聚合酶扩增(RPA):在RPA反应中,T4 gp32能够显著提高扩增效率,适用于快速、等温的核酸检测。RT-PCR和qPCR:通过结合ssDNA,T4 gp32能够提高反转录效率,增强反应的灵敏度。

操作简单:无需脱色或冲洗,可直接使用紫外凝胶透射仪观察。

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。

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