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2025-05-08 07:20分类: 质粒应用 阅读:

 

它不仅简化了实验流程,更提升了实验结果的质量,是分子生物学实验室不可或缺的精准检测利器。

在生物体的分子世界中,核糖核酸酶H(RNase H)是一种具有独特功能的酶,它专门识别并切割DNA-RNA杂交体中的RNA链,因此被誉为DNA-RNA杂交体的“拆解专家”。 RNase H广泛存在于生物体内,从细菌到人类细胞中都有其身影。它是一种内切酶,能够特异性地识别DNA-RNA杂交双链中的RNA部分,并在RNA链上切割磷酸二酯键。这种酶的活性对于维持细胞内的核酸代谢平衡至关重要。在细胞的DNA复制和修复过程中,RNase H发挥着不可或缺的作用。例如,在DNA复制过程中,RNA引物被合成以启动DNA链的合成,而RNase H则负责移除这些RNA引物,以便DNA聚合酶能够继续合成DNA链,从而确保DNA复制的顺利进行。 此外,RNase H在转录偶联修复(TCR)过程中也扮演着重要角色。当DNA损伤发生在正在转录的基因中时,RNA聚合酶可能会停滞在损伤位点。此时,RNase H能够移除RNA聚合酶前方的RNA-DNA杂交体,从而为DNA修复酶提供空间,促进损伤的修复。这一过程对于维持基因组的稳定性和细胞的正常功能至关重要。 在分子生物学研究中,RNase H也被广泛应用于各种实验。

其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。

RNA/蛋白抽提试剂盒是一种能够同时从同一样本中提取高质量RNA和蛋白质的工具,广泛应用于分子生物学研究。它通过优化的化学裂解和分离技术,实现了RNA和蛋白质的高效提取,特别适用于珍贵样本的处理。 工作原理 RNA/蛋白抽提试剂盒基于特殊裂解液的多组分分离原理。样本在裂解液中裂解后,经过离心分层,RNA存在于上层水相中,而蛋白质则沉淀在中间相和有机相中。通过异丙醇沉淀和洗涤步骤,可分别获得高纯度的RNA和蛋白质。 优势 高效性:操作简单快速,仅需约1小时即可完成RNA和蛋白质的提取。 高纯度:提取的RNA无蛋白和DNA污染,蛋白质纯度高,适用于多种下游实验。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括动物细胞、组织、植物、酵母、细菌和病毒等。 节省样本:特别适合珍贵样本的处理,可最大化回收RNA和蛋白质。 提取的RNA可用于RT-PCR、cDNA克隆、Northern blot、体外翻译、基因表达芯片分析和高通量测序等实验。提取的蛋白质可用于SDS-PAGE、Western blot和免疫沉淀等分析。

One Step RT-qPCR SYBR能够提供高灵敏度的检测结果,无需额外的RNA纯化步骤

核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究。其截短体则是通过基因工程改造,删除部分氨基酸序列而获得的变体,通常用于特定的研究目的,如提高酶的稳定性或特异性。 功能与特性 N-糖基化酶活性:识别并切除双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生脱嘌呤(AP)位点。 AP-裂解酶活性:在AP位点的3'和5'端切割磷酸二酯键,产生具有3'和5'磷酸的碱基缺口。 高纯度与稳定性:核酸内切酶VIII截短体通过重组表达获得,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶和RNase残留。 热失活:75℃孵育10分钟可使酶失活。 应用场景 DNA损伤修复研究:用于模拟和修复DNA损伤,特别是在氧化损伤研究中。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):评估细胞内和体外的氧化DNA损伤。 NGS建库:在二代测序中,特异性切除含AP位点的模板链,实现双端测序。 酶法合成DNA:释放DNA链,用于合成特定的DNA结构。

Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 高保真性,快速扩展

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。

电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心手段,而Hot-Start Taq Master Mix (2×)(无染料)则是这一技术的升级版,为实验人员提供了一个高效、精准且便捷的PCR反应体系。 Hot-Start Taq Master Mix (2×)是一种预配制的双倍浓度PCR反应混合液,专为提高PCR反应的特异性和灵敏度而设计。它结合了Hot-Start技术与Taq DNA聚合酶的优势,同时省略了染料成分,为后续的实验操作提供了更大的灵活性。 Hot-Start技术是该Master Mix的核心亮点。传统Taq酶在室温下即可表现出活性,容易导致引物的非特异性结合和扩增产物的背景噪声。而Hot-Start Taq Master Mix通过化学修饰或抗体结合的方式,使Taq酶在室温下处于“关闭”状态,只有在高温变性步骤(通常在95℃)时才会被激活。这种机制有效避免了非特异性扩增,尤其适用于复杂模板或低丰度目标基因的扩增。

Plant Direct PCR Master Mix (2×) 是一种专为植物样本设计的预混液

在分子生物学研究中,RNA的稳定性和完整性对于实验的成功至关重要。然而,RNA分子在实验过程中极易受到核糖核酸酶(RNases)的降解,这给RNA相关的研究带来了极大的挑战。RNases抑制剂作为一种高效的保护工具,为RNA的稳定性和完整性提供了坚实的保障。 RNases抑制剂的作用机制 RNases抑制剂是一类能够特异性结合并抑制核糖核酸酶活性的蛋白质或小分子化合物。它们通过与核糖核酸酶形成稳定的复合物,阻止核糖核酸酶对RNA的降解作用。这种抑制剂对多种核糖核酸酶具有广泛的抑制活性,包括RNase A、RNase B和RNase C等,能够有效保护RNA免受降解。 试剂的优势 RNases抑制剂具有高效、稳定和特异性强的特点。它们能够在广泛的pH值和温度范围内保持活性,确保在不同的实验条件下都能有效抑制核糖核酸酶的活性。此外,RNases抑制剂的特异性结合能力使其对其他酶类的活性影响极小,从而保证了实验的准确性。 广泛的应用 RNases抑制剂在RNA相关的研究中具有广泛的应用。

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