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2025-04-30 07:20分类: 菌种介绍 阅读:

 

通过优化的缓冲体系和酶组合,试剂盒在非特异性扩增体系中仍能保持单峰的熔解曲线,确保了结果的高特异性

在分子生物学研究和临床检测中,快速、准确地检测RNA序列是许多实验的关键。One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)凭借其独特的优势,成为实现这一目标的理想选择。 该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。这种设计不仅简化了操作流程,减少了移液步骤,还有效降低了样本间交叉污染的风险。同时,试剂盒中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能够降解含有尿嘧啶的PCR产物,从而有效防止因残留产物导致的假阳性结果。 One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)还具备高灵敏度和高特异性的特点。它采用了优化的反应体系,能够高效合成cDNA,并在后续的qPCR中实现精准定量。即使对于低丰度的RNA模板,该试剂盒也能准确识别,特别适合检测微量RNA。此外,其热启动Taq DNA聚合酶和优化的反应条件,进一步提高了扩增效率和特异性。 在实际应用中,One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)广泛适用于检测总RNA、mRNA、RNA病毒等样本。

Pfu DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,能够在扩增过程中纠正碱基错配,是Taq酶的10-50倍

在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。而6×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。 6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。它含有甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF等成分。其中,甘油可以增加样品的密度,使样品沉入凝胶加样孔中,防止样品漂浮;EDTA则用于螯合金属离子,防止DNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。 使用6×DNA Loading Buffer时,通常按照1:5(Loading Buffer:DNA样品)的比例混合。例如,对于5μL的DNA样品,加入1μL的6×Loading Buffer,混匀后即可加样。这种缓冲液适用于多种浓度的琼脂糖凝胶,溴酚蓝在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶中的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。

该产品不仅适用于琼脂糖凝胶电泳还可用于非变性丙烯酰胺凝胶电泳,加入PCR产物后不会影响后续的酶切反应

碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的碱性DNA电泳缓冲液,主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成,呈强碱性。它广泛应用于碱性琼脂糖凝胶电泳实验中。产品特性成分:主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成。保存条件:室温保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。包装:通常以500 mL包装提供。使用方法稀释:使用无菌蒸馏水或去离子水将10×缓冲液稀释至1×工作液。制备琼脂糖凝胶:在三角烧瓶或玻璃瓶中加入准确量的琼脂糖粉和定量的水。加热使琼脂糖完全溶解,注意搅拌防止烧焦。冷却至55°C后,加入0.1倍体积的10×碱性凝胶电泳缓冲液,迅速灌制凝胶。电泳操作:将稀释后的1×缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加入样品后开始电泳,建议使用小于3.5 V/cm的电压。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。废弃物处理:使用后的废弃物应按照相关法律法规进行处理。

溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。

溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。

RcView 吖啶橙核酸染料凭借其高效、安全和特异性强的特点,成为核酸染色实验中的理想选择。

在分子生物学的研究中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的挑战之一。然而,随着Ultra-Long DNA Polymerase的出现,这一难题得到了有效解决。Ultra-Long DNA Polymerase以其卓越的长片段扩增能力和高保真性,成为了现代分子生物学实验中的强大工具。 Ultra-Long DNA Polymerase是一种专门针对长片段DNA扩增而设计的聚合酶。它结合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。例如,在研究大型基因或基因簇时,Ultra-Long DNA Polymerase能够提供完整的基因序列信息,避免因片段过短而导致的拼接错误。 除了长片段扩增能力外,Ultra-Long DNA Polymerase还具有高保真性。它通过内置的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增产物的准确性。

在含有抑制剂的样本中SYBR Green qPCR Mix 仍能保持较高的扩增效率适用于复杂样本检测

在分子生物学和生物化学研究中,DNA的完整性和准确性对于实验的成功至关重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG),特别是来自大肠杆菌(E. coli)的UDG,是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶。UDG (5U/µl)以其高效的修复能力和精准的特异性,成为了许多实验中不可或缺的工具。 UDG的作用机制 UDG是一种DNA修复酶,能够特异性识别DNA中的尿嘧啶(U),并将其从DNA链中移除。这种酶的作用机制基于其对尿嘧啶的高亲和力。在DNA合成过程中,尿嘧啶可能会由于脱氨反应或其他化学修饰而意外掺入DNA链中。UDG通过识别这些尿嘧啶,并将其从DNA链中切除,从而防止错误碱基的积累。这种修复过程是维持DNA完整性和基因组稳定性的重要机制。 UDG在实验中的应用 PCR反应中的防污染:在PCR实验中,UDG常用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在PCR反应前加入UDG,可以将引物中的尿嘧啶降解,从而避免引物在反应前的非特异性结合。这种方法被称为“热启动PCR”,能够显著提高PCR反应的特异性和灵敏度。

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