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木霉属Trichodermasp.AS3.703-普鲁士蓝染色液(核固红法)-脱氧胆酸钠溶液(5%)

2025-04-30 07:20分类: 藻类介绍 阅读:

 

在模拟污染实验中,UDG防污染系统能够有效降解含尿嘧啶的DNA污染避免了假阳性结果的出现确保了可靠性

DNA Marker I Plus是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA条带组成,覆盖100 bp到700 bp的范围,条带大小分别为100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,无需额外处理。清晰的电泳条带:条带浓度均匀,其中400 bp条带为加亮带,便于观察。适用范围:适用于100 bp到700 bp的DNA片段分析,不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。使用方法上样量:根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。一般情况下,每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;窄齿梳子(1 mm × 2 mm)上样2 µL;宽齿梳子(1 mm × 5 mm)上样5 µL。电泳条件:建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。染色与观察:电泳结束后,使用EB或Goldview等染料染色,然后在紫外灯下观察条带。

使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合

碱性凝胶加样缓冲液(6×)是一种6倍浓缩的DNA上样缓冲液,专为碱性琼脂糖凝胶电泳设计。它以溴酚蓝和二甲苯青FF为指示剂,稀释至1×后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于电泳指示。产品特性主要成分:溴甲酚绿、二甲苯青FF、Ficoll 400、NaOH和EDTA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。使用方法稀释:将6×碱性凝胶加样缓冲液与DNA样品按1:5的比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。 避免污染:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。开封后尽快使用:试剂开封后应尽快使用,以防影响后续实验效果。碱性凝胶加样缓冲液(6×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为碱性琼脂糖凝胶电泳实验中的理想选择。

在多组分检测中,ROX染料的稳定信号为其他荧光信号提供了稳定的基线有助于更准确地分析多重qPCR反应

10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。

在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。

SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。

在模拟污染实验中,dUTP/UDG防污染系统能够有效降解含尿嘧啶的DNA污染,避免了假阳性结果的出现

在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和便捷性是科研人员追求的目标。Pfu Master Mix (2×) (With Dye)凭借其高保真性和预混染料的特性,成为了实现这一目标的理想选择。 Pfu Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自耐热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增的准确性。与传统Taq酶相比,Pfu酶的保真度更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 与无染料版本不同,Pfu Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料,这使得实验人员在进行PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。这种预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。

通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。

在分子生物学领域,DNA聚合酶是PCR技术的核心工具,而Pfu DNA Polymerase因其卓越的高保真性脱颖而出,成为精准基因扩增的首选酶。 Pfu DNA Polymerase是从嗜热菌Pyrococcus furiosus中分离纯化而来的一种耐热DNA聚合酶。与常见的Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶最大的优势在于其具有强大的3'到5'外切酶活性,这种活性赋予了Pfu酶校正功能,使其在DNA合成过程中能够及时纠正错误配对的碱基,从而显著提高DNA扩增的准确性。研究表明,Pfu酶的保真度是Taq酶的约7倍,这意味着在扩增长片段DNA或需要高准确性的基因克隆实验中,Pfu酶能够更有效地避免突变的产生。 Pfu DNA Polymerase的耐热性也使其能够适应PCR反应中的高温变性步骤,保证在每个循环中都能稳定地合成DNA。这种耐热性与高保真性相结合,使得Pfu酶在长片段DNA扩增中表现出色。由于其校正功能减少了错误碱基的累积,Pfu酶能够更有效地合成较长的DNA片段,而不会因突变导致扩增失败。

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