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2025-05-03 07:20分类: 基因应用 阅读:

 

DL2000 II主要用于琼脂糖凝胶电泳中作为双链线状DNA分子量大小的参照适用于DNA片段大小分析

phi29 DNA Polymerase 是一种来源于 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,经过基因工程改造后,具有卓越的链置换和持续合成能力。它能够在等温条件下高效扩增DNA,生成长达70 kb的DNA片段。 特性与优势 高持续合成能力:phi29 DNA Polymerase 可以连续合成超过70 kb的DNA片段,无需从模板上解离。 高保真性:具有3′→5′外切酶校正活性,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。 链置换活性:能够高效置换DNA链,适合滚环扩增(RCA)和多重置换扩增(MDA)。 温和反应条件:反应温度通常为37-42℃,适合等温扩增。 应用场景 全基因组扩增(WGA):用于单细胞测序、病原微生物检测和宏基因组研究。 滚环扩增(RCA):生成周期性DNA纳米模板,适用于测序模板制备。 多重置换扩增(MDA):用于无偏扩增全基因组。 高GC含量模板扩增:在NGS测序中,能够提升高GC含量和复杂模板的扩增效率。 使用方法 储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。 反应条件:37-42℃孵育1-3小时,65℃加热10分钟失活。

dNTP Mix是不可或缺的关键试剂,广泛应用于PCR扩增、cDNA合成、DNA测序、引物延伸反应等

Bst DNA Polymerase, Large Fragment 是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的重组酶,具有5′→3′ DNA聚合酶活性和强大的链置换能力,但缺乏5′→3′核酸外切酶活性。这种酶在等温扩增技术中表现出色,尤其适用于环介导等温扩增(LAMP)和滚环扩增(RCA)等应用。功能与特性链置换活性:Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。高耐盐性:该酶在高盐环境中表现出良好的活性,适合处理复杂的生物样本。 高灵敏度:能够在低浓度模板下实现高效的DNA扩增。热稳定性:最佳活性温度为65℃,可在60-70℃的温度范围内稳定工作。应用场景环介导等温扩增(LAMP):用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。高GC含量DNA测序:适用于高GC含量的DNA模板的测序。全基因组扩增(WGA):用于微量DNA模板的快速扩增。

它不仅简化了实验流程,更提升了实验结果的质量,是分子生物学实验室不可或缺的精准检测利器。

GoldenView 吖啶橙核酸染料是一种新型的核酸染料,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于检测DNA和RNA。它是一种安全、高效的替代品,可替代传统的溴化乙锭(EB)染料。 产品特性 GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。在紫外透射光下,双链DNA(dsDNA)呈现绿色荧光,而单链DNA(ssDNA)或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。 使用方法 使用GoldenView进行琼脂糖凝胶电泳时,操作方法与EB完全相同。通常在100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µl的GoldenView,轻轻摇匀后倒胶,待凝胶完全凝固后进行电泳。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带。 安全性 GoldenView的主要成分是吖啶橙,虽然具有细胞渗透性,但通过多项致突变性试验验证,结果均为阴性。然而,为确保安全,建议操作时佩戴手套和口罩,避免接触皮肤。

dITP溶液纯度大于99%,不含DNase、RNase磷酸酶和蛋白酶确保在实验中不会受到核酸酶的干扰

在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和便捷性是科研人员追求的目标。Pfu Master Mix (2×) (With Dye)凭借其高保真性和预混染料的特性,成为了实现这一目标的理想选择。 Pfu Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自耐热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增的准确性。与传统Taq酶相比,Pfu酶的保真度更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 与无染料版本不同,Pfu Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料,这使得实验人员在进行PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。这种预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。

电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和效率是科研人员关注的重点。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性,成为了高精度基因扩增实验的理想选择。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。其核心成分是Phusion DNA聚合酶,这种聚合酶融合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力,能够在保证高准确性的前提下快速扩增DNA片段。Phusion酶的保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。

尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。

2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。

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