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罗布泊别样放线孢菌-詹氏丙酸杆菌SHMCCD51922=ATCC4964=NCIMB5867-冻胶假丝酵母Candida gelida

2025-05-06 07:20分类: 质粒介绍 阅读:

 

在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。

甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×)是一种专为甲基氢氧化汞电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中。它主要由硼酸、硼酸钠和硫酸钠组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:由500 mM硼酸、50 mM硼酸钠和硫酸钠组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×工作液含有50 mM硼酸、5 mM硼酸钠和微量硫酸钠,pH值约为8.1。高效分离:适用于甲基氢氧化汞电泳,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期为12个月。使用方法稀释:将10×甲基汞凝胶电泳缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。制备凝胶:将琼脂糖溶解于1×缓冲液中,加热熔化,冷却至55℃后加入甲基氢氧化汞,使其终浓度为5 mM。电泳操作:将样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项水质要求:使用的蒸馏水或去离子水应尽量少含金属离子,以避免影响电泳效果。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。保存条件:室温保存,开封后建议尽快使用。

SYBR Green I的诱变性明显低于EB,但仍需谨慎操作,避免直接接触皮肤。

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。

dNTP/dUTP Mixture 与尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)联合使用可有效降解含dU的假阳性

Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯

RcView 吖啶橙核酸染料的使用方法与溴化乙锭(EB)相同,操作简便。

SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。

二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。

Bst Plus DNA Polymerase 是一种来源于嗜热土芽孢杆菌(Thermophilic Geobacillus sp.)的DNA聚合酶,经过基因工程改造去除了5′→3′核酸外切酶活性。该酶具有强大的5′→3′ DNA聚合酶活性、链置换活性以及对dUTP的耐受性,非常适合用于防污染的等温扩增反应。 产品特性 高灵敏度:在LAMP等温扩增反应中,灵敏度低至50 copies/T,反应时间小于15分钟。 高扩增效率:能够在65℃的等温条件下高效扩增DNA,反应时间通常为30-60分钟。 dUTP耐受性:具有较高的dUTP耐受性,适合防污染的等温扩增反应。 热稳定性:最佳反应温度为65℃,可在50-68℃的温度范围内稳定工作。 应用场景 Bst Plus DNA Polymerase 广泛应用于以下领域: 环介导等温扩增(LAMP):用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。 链置换扩增(SDA):用于高灵敏度的核酸扩增。 滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。 全基因组扩增(WGA):用于微量DNA模板的快速扩增。 使用方法 储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。

Taq DNA Polymerase是一种源自嗜热菌的耐热性DNA聚合酶。

DNA Marker III是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA片段组成,片段大小分别为200 bp、500 bp、800 bp、1200 bp、2000 bp、3000 bp和4500 bp。其中,1200 bp条带的浓度最高,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。 适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:凝胶浓度:建议使1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。注意事项 琼脂糖质量:建议使用高质量的琼脂糖,以获得更好的电泳效果。电泳缓冲液:使用新鲜配制的电泳缓冲液,避免多次电泳后缓冲液电导增强。保存条件:建议低温保存,以防止核酸酶污染。

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