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迷宫栓孔菌SHMCCD64448-苏云金芽孢杆菌SHMCCD51221ivcas7.00615-东方伊萨酵母SHMCCD53936

2025-05-07 07:20分类: 菌种特点 阅读:

 

如果凝胶中预先加入 EB,电泳结束后紫外灯下观察时200 bp 以下条带亮度较弱,可通过凝胶后染方法

λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII和EcoRI两种限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker由13条双链DNA条带组成,片段大小范围从125 bp到21,226 bp。即用型设计:已预混1×上样缓冲液,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。

灵敏度高:能够检测到低浓度的核酸,适用于各种大小片段的电泳染色。

分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性、纯度和分子量。而5×RNA Loading Buffer则是RNA电泳中不可或缺的重要试剂。 5×RNA Loading Buffer是一种5倍浓缩的上样缓冲液,专为RNA非变性凝胶电泳设计。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF。甘油的作用是增加样品的密度,使RNA样品能够顺利沉入凝胶加样孔中,避免漂浮。EDTA则用于螯合金属离子,防止RNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。 使用时,通常将RNA样品与5×RNA Loading Buffer按4:1的体积比混合,例如4μL的RNA样品加入1μL的上样缓冲液,混匀后即可上样。这种缓冲液经过DEPC处理,确保无RNase污染,从而保护RNA样品的完整性。 5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。它不仅操作简便,还能有效防止RNA降解,确保电泳结果的可靠性。

适用于多种实验条件,包括不同的琼脂糖浓度和电泳电压(4-10 V/cm),能够根据实验需求灵活调整

SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。

Pfu DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,能够在扩增过程中纠正碱基错配,是Taq酶的10-50倍

T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入特定的氨基酸突变(如R55K和K227Q),在保持高效连接活性的同时,显著降低了RNA的非特异性连接问题。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端,无需ATP参与反应。 特点 高效连接活性:能够高效连接预腺苷化的单链DNA或RNA。 低背景连接:突变型酶减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无核酸酶污染:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 热稳定性高:某些突变体在较高温度(如45℃和50℃)下仍保持较高的连接活性。 应用 T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA文库构建。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。 灭活条件:65℃加热20分钟。

该产品预混了高浓度的ROX参考染料,适用于需要高浓度ROX校准的qPCR仪器,能够有效校正孔间荧光

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而备受青睐,尤其适用于需要精确检测目标基因的实验场景。然而,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要高浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异,以确保定量的准确性和重复性。为此,Probe qPCR Mix (2×, High ROX)应运而生,它为这些特定需求提供了完美的解决方案。 高浓度ROX的重要性 ROX参考染料在qPCR实验中扮演着关键角色,它能够校正由于仪器荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异所导致的非特异性荧光信号。对于某些qPCR仪器,高浓度的ROX是实现精准定量的必要条件。Probe qPCR Mix (2×, High ROX)中的ROX浓度经过精确调整,能够满足这些仪器对高浓度ROX的需求,从而有效提高定量的准确性和重复性。 产品特点 优化的反应体系:Probe qPCR Mix (2×, High ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。

DNA Marker VII用于验证质粒酶切后的片段大小,确保酶切反应的完整性,快速估算DNA片段

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。

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