对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测，结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测

在分子生物学和生物医学研究中，荧光定量PCR（qPCR）是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR Probe Kit作为一种一体化的一步法探针法qPCR试剂盒，为研究人员提供了一个高效、便捷且高特异性的实验解决方案，特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应，将RNA转录为cDNA，然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果，但操作步骤繁琐，容易引入误差。而One Step RT-qPCR Probe Kit采用了一步法设计，将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中，大大简化了操作流程，减少了人为误差，提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶：该试剂盒含有高效的逆转录酶，能够在短时间内将RNA转录为cDNA，确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系：试剂盒中的反应体系经过优化，包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、探针法qPCR所需的荧光染料以及其他必要的成分。

Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析

Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液，经过RNase-free处理，能够有效避免RNA降解，确保电泳结果的可靠性。产品特性 成分：主要由450 mM Tris-硼酸、10 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度：稀释5倍后得到的0.5×TBE工作液含有45 mM Tris-硼酸和1 mM EDTA，pH值约为8.0。 无RNase污染：经过DEPC处理，确保无RNase污染，适用于RNA电泳。稳定性高：室温保存，有效期长达12个月。使用方法稀释：将5×TBE缓冲液用DEPC处理水稀释5倍，制备0.5×工作液。例如：取10 mL 5×TBE，加入90 mL DEPC处理水，混匀即可。电泳操作：将稀释后的0.5×TBE缓冲液加入电泳槽中，确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳，电泳条件根据实验需求调整。染色与观察：电泳结束后，使用合适的RNA染料（如EB或Goldview）染色。在紫外灯下观察RNA条带。注意事项 沉淀处理：如果出现沉淀，可置于37℃水浴中使其溶解，不影响使用。

这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计，使得实验操作更加便捷高效。

甲醛凝胶加样缓冲液(10×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的10倍浓缩上样缓冲液，经过RNase-free处理，能够有效避免RNA降解，确保电泳结果的可靠性。产品特性成分：主要由溴酚蓝、二甲苯青FF、甘油、EDTA和DEPC处理水组成。用途：专用于RNA甲醛变性凝胶电泳，稀释至1×后比重较大，加样后易下沉，颜色清晰可见，便于电泳指示。保存条件：室温避光保存，有效期为12个月。使用方法稀释：按照每9μL RNA样品加入1μL甲醛凝胶加样缓冲液(10×, RNase free)的比例混合。电泳操作：将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中，进行电泳。注意事项避免RNase污染：实验过程中需佩戴无RNase手套，避免使用可能含有RNase的耗材。分装使用：如果每次使用量较小，建议分装后使用，避免反复冻融。个人防护：操作时需佩戴实验服和一次性手套，以确保安全。甲醛凝胶加样缓冲液(10×, RNase free)凭借其高效、稳定和无RNase污染的特性，成为RNA电泳实验中的理想选择。

如果凝胶中预先加入 EB，电泳结束后紫外灯下观察时200 bp 以下条带亮度较弱，可通过凝胶后染方法

2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂，能够有效解除核酸的二级结构，使其保持单链构型，从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括：尿素（Urea）：用于解除核酸的二级结构，保持核酸的单链状态。 溴酚蓝（Bromophenol Blue） 和 二甲苯青（Xylene Cyanol FF）：作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA：维持电泳过程中的缓冲体系，确保电泳条件的稳定。聚蔗糖（Ficoll）：增加样品密度，帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理：将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟，使核酸充分变性，之后立即置于冰上冷却。上样与电泳：将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中，进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA（ssDNA）和 RNA 的变性凝胶电泳，广泛应用于基因分型检测（如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等）。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。

溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂，分别指示电泳的进程，帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。

T4 Gene 32 Protein（gp32）是一种单链DNA（ssDNA）结合蛋白，来源于T4噬菌体，广泛应用于分子生物学实验中。它在T4噬菌体的DNA复制、重组和修复过程中发挥关键作用。功能与特性稳定ssDNA：gp32能够特异性结合ssDNA，防止其重新退火或被核酸酶降解，从而保护ssDNA的完整性。促进DNA代谢：通过与ssDNA结合，gp32为多种DNA代谢相关蛋白（如DNA聚合酶、限制性内切酶等）提供结合位点，促进其功能。结构域功能：gp32由三个结构域组成，其中C端结构域在调节ssDNA结合和与其他蛋白的相互作用中起关键作用。应用场景电子显微镜观察：用于稳定和标记ssDNA区域，便于通过电子显微镜观察细胞内DNA的结构。提高RT-PCR效率：在RT-PCR中，gp32能够增加反转录酶的产量和过程性，从而提高反应效率。增强PCR产物产量：在PCR反应中，gp32能够提高产物的产量和特异性，特别是在处理复杂样本（如土壤样本）时，可有效降低抑制物的影响。重组酶聚合酶扩增（RPA）：在RPA反应中，gp32能够显著提高扩增效率，适用于快速、等温的核酸检测。

EDTA：60 mM，用于螯合二价金属离子，防止核酸在电泳过程中被降解。

T4 UvsY蛋白是一种来源于T4噬菌体的重组调节蛋白，分子量约为16 kDa。它在T4噬菌体的同源重组过程中发挥关键作用，通过促进T4 UvsX重组酶与单链DNA（ssDNA）的结合，增强同源重组的效率。功能与作用机制重组调节：UvsY蛋白通过与UvsX重组酶形成复合物，促进UvsX与ssDNA的结合，从而加速链置换反应。 单链DNA结合：UvsY蛋白本身具有单链DNA结合活性，能够稳定ssDNA并促进其与UvsX的结合。释放单链结合蛋白：UvsY蛋白能够从ssDNA-单链结合蛋白复合物中释放单链结合蛋白（如T4 gp32），为UvsX重组酶提供结合位点。应用场景 T4 UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增（RPA）技术的核心组分之一，广泛应用于等温核酸扩增。它能够显著提高RPA反应的效率和特异性，适用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。

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