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Ramlibacterrhizophilus-木耳SHMCCD69868-TKB1大肠杆菌

2025-05-08 07:20分类: 基因介绍 阅读:

 

在模拟污染实验中,dUTP/UDG防污染系统能够有效降解含尿嘧啶的DNA污染,避免了假阳性结果的出现

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。

甘油(Glycerol):含量为60%,用于增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔。

在分子生物学和生物医学研究中,逆转录定量PCR(RT-qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit作为一种一体化的试剂盒,为研究人员提供了一种高效、便捷的一步法RT-qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶:该试剂盒含有高效的逆转录酶,能够在短时间内将RNA转录为cDNA,确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系:试剂盒中的反应体系经过优化,包含SYBR Green荧光染料、热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺等所有必需成分,确保了qPCR反应的高效扩增。

SYBR多次冻融实验中表现出良好的稳定性,即使经过20次冻融,其扩增性能与对照组相比无显著差异

在分子生物学的微观世界中,T7 RNA聚合酶宛如一位技艺高超的“分子工程师”,以其独特的功能和卓越的性能,推动着基因转录的高效进行。 T7 RNA聚合酶来源于T7噬菌体,是一种单亚基酶。它结构简单,却拥有惊人的转录效率。与细胞内的多亚基RNA聚合酶相比,T7 RNA聚合酶无需复杂的组装和调控,就能迅速启动转录过程。它能够特异性地识别T7噬菌体的启动子序列,一旦结合,便如同被按下启动键,快速而准确地合成RNA分子。 这种酶的高效性源于其独特的催化机制。它在转录过程中能够稳定地结合模板DNA,减少滑动和脱落的概率,从而保证了RNA合成的连续性和准确性。T7 RNA聚合酶不仅在噬菌体的生命周期中发挥着关键作用,还在生物技术领域大放异彩。科学家们利用它开发出了高效的体外转录系统,用于合成特定的RNA分子,如mRNA、tRNA等。这些合成的RNA可用于研究基因表达调控、蛋白质合成机制,以及开发新型的基因治疗载体。 T7 RNA聚合酶还具有很强的耐受性,能够在较宽的温度和pH范围内保持活性。这使得它在各种实验条件下都能稳定工作,成为实验室中不可或缺的工具酶。

这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计,使得实验操作更加便捷高效。

Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性 成分:主要由450 mM Tris-硼酸、10 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度:稀释5倍后得到的0.5×TBE工作液含有45 mM Tris-硼酸和1 mM EDTA,pH值约为8.0。 无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将5×TBE缓冲液用DEPC处理水稀释5倍,制备0.5×工作液。例如:取10 mL 5×TBE,加入90 mL DEPC处理水,混匀即可。电泳操作:将稀释后的0.5×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察RNA条带。注意事项 沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。

如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。

10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。

该酶在较高温度(如37℃)和补充Mn²⁺的条件下也能保持较高活性。

MOPS电泳缓冲液(1×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由MOPS、乙酸钠和EDTA组成。缓冲能力:在pH 6.5 - 7.9范围内具有良好的缓冲能力,适用于中性pH条件下的RNA电泳。无RNase污染:经过RNase-free处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温避光保存,有效期长达1年。使用方法直接使用:1×浓度,无需稀释,直接使用。电泳操作:将配制好的1×MOPS缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。 在紫外灯下观察RNA条带。保存与注意事项保存条件:室温避光保存,开封后建议尽快使用。避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。溶液变色:溶液见光后易变黄,淡黄色不影响使用,但颜色过深建议停止使用。

上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!

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